Pokryte DNA złote nanocząsteczki do wykrywania mRNA u żywych zwierząt Hydra Vulgaris
Maria Moros, Maria-Eleni Kyriazi, Afaf H. El-Sagheer, Tom Brown, Claudia Tortiglione* i Antonios G. Kanaras*
Abstrakcyjny
Postępy w projektowaniu nanocząstek doprowadziły do opracowania systemów nanocząstek, które mogą wykrywać cząsteczki wewnątrzkomórkowe, zmieniać procesy komórkowe i uwalniać leki do określonych celów in vitro. W tej pracy pokazujemy, że pokryte oligonukleotydami nanocząstki złota są odpowiednie do wykrywania mRNA w żywym organizmie modelowym Hydra vulgaris, bez naruszania integralności zwierzęcia. Skupiamy się w szczególności na wykrywaniu mRNA Hymyc1, który odpowiada za regulację równowagi między samoodnową a różnicowaniem komórek macierzystych. Deregulacja Myc występuje w ponad połowie ludzkich nowotworów, dlatego też zdolność do wykrywania in vivo mRNA za pomocą innowacyjnych systemów fluorescencyjnych jest najbardziej interesująca.
SŁOWA KLUCZOWE:
SPECJALNA SPRAWA
Ten artykuł jest częścią Translational DNA Nanotechnology specjalna sprawa.
Wstęp
SEKCJE ARTYKUŁÓW
Synteza 13,9 ± 1,4 nm AuNPs
Mieszając (700 obr/min) doprowadzono do wrzenia roztwór tetrachlorozłoniaczanu sodu (1 mM, 100 ml). Następnie do roztworu złota wstrzyknięto roztwór cytrynianu sodu (2% wag., 5 ml). Po zmianie koloru roztworu mieszanie (700 obr./min) kontynuowano przez kolejne 15 min. Gdy mieszanina reakcyjna osiągnęła temperaturę pokojową, dodano roztwór bis-sulfonatofenylofosfiny (BSPP, 42 mg w 2 ml wody Milli-Q) i roztwór pozostawiono z mieszaniem przez noc, aby zapewnić pomyślną wymianę ligandu. Otrzymane sferyczne AuNP powleczone BSPP przepuszczono przez 0,45 (μm) filtr Millipore w celu usunięcia dużych agregatów i dalej oczyszczono w dwóch rundach wirowania (10000 obr./min, 20 min). Oczyszczanie było wspomagane przez stopniowe dodawanie stężonego roztworu NaCl aż do zaobserwowania zmiany koloru z czerwonego na niebieski, co wskazuje na wytrącanie cząstek. Zsyntetyzowane AuNPs ostatecznie ponownie zdyspergowano w 3 ml wody Milli-Q i przechowywano w 4°C.
Projektowanie oligonukleotydów
Sekwencje dla nanosond Hymyc1 zaprojektowano w oparciu o sekwencję genu Hymyc 1 (nr dostępu GenBank GQ856263). Nici „sensowne” zaprojektowano tak, aby miały długość 29 zasad (sekwencja docelowa zawierająca ogon poliA, patrz Tabela S1) z zawartością GC <50%. Nici „flare” zaprojektowano tak, aby miały temperaturę topnienia >40 °C i długość 10 zasad (sekwencje patrz Tabela S1). Narzędzie Basic Local Assignment Search Tool (BLAST) zostało użyte do oceny swoistości i braku sekwencji niezgodnych z docelowymi
Synteza DNA-AuNP do wykrywania mRNA
Zsyntetyzowane AuNPs zmodyfikowano za pomocą otoczki z „sensownych” nici oligonukleotydowych zaprojektowanych do wykrywania określonych celów mRNA poprzez przyjęcie podejścia polegającego na starzeniu się soli. Pokrótce, powleczone BSPP AuNPs w wodzie (10 nM, 1 ml) inkubowano z roztworem „sensownych” nici oligonukleotydów zakończonych grupą tiolową (3 µM, 1 ml) i wytrząsano przez 24 godziny. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano BSPP (1 mg/20 μL, 10 μL) wraz z buforem fosforanowym (0,1 M, pH 7,4) i SDS (10%) w celu uzyskania końcowego stężenia 0,01 M i 1% fosforanu odpowiednio bufor i SDS. Pomyślne przyłączenie oligonukleotydów osiągnięto następnie przez stopniowe zwiększanie stężenia soli. Sześć dodawania NaCl (2 M) przeprowadzono w ciągu 8 godzin, co dało końcowe stężenie soli 0,3 M. Uzyskane AuNP pokryte oligonukleotydami oczyszczono przez trzy rundy wirowania (16400 obr./min, 20 min) i przechowywano w 4°C. C w buforze do hybrydyzacji (5 mM bufor fosforanowy, 80 mM NaCl).
Nici „sensowne” oligonukleotydów hybrydyzowano z ich komplementarnymi nićmi „flare” przez inkubację roztworu nici „sensownych” pokrytych oligonukleotydami (40 nM, 500 μl) z nadmiarem komplementarnej nici „flare” (2,4 μM, 500 μl ). Roztwór następnie ogrzewano do 65 °C przez 5 min, a następnie powoli schładzano do temperatury pokojowej. Otrzymane sondy oczyszczono przez dwie rundy wirowania (16400 rpm, 15 min) i ostatecznie ponownie zdyspergowano w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem (PBS).
Kultura zwierząt
Hydra vulgaris hodowano bezpłciowo w pożywce Hydra (1 mM CaCl2 i 0,1 mM NaHCO3) przy pH 7. Zwierzęta utrzymywano w temperaturze 18 ± 1 °C i karmiono trzy razy w tygodniu świeżo wyklutymi Artemia salina nauplii.
Test toksyczności
Grupy po 10 polipów umieszczono w plastikowych studzienkach i inkubowano z sondami AuNP (10 nM, 300 µl) przez 24 godziny. Po przemyciu polipów pożywką Hydra, morfologię zwierząt monitorowano za pomocą stereomikroskopu (Olympus SZX-RFL2), a potencjalne działania niepożądane uszeregowano, przypisując punktację liczbową, jak opisano wcześniej.(49)
Obrazowanie w trybie Vivo
Do eksperymentów wybrano grupy po 10 polipów z jednorodnych populacji i inkubowano z sondami AuNP (10 nM, 300 µl) przez 3 h w pożywce Hydra. Zwierzęta trzymano w 18°C i chroniono przed światłem. Po intensywnym płukaniu wykonano obrazowanie in vivo przy użyciu odwróconego mikroskopu fluorescencyjnego (DMI 6000, Leica wyposażonego w kamerę Leica DFC360FX) lub Nikon Eclipse TIE. Obrazy uzyskano za pomocą modułu filtrującego Cy3/TRITC (λexc = 552 nm, λem = 578 nm) i modułu filtrującego FITC (λexc = 489 nm, λem = 508 nm). Zdjęcia wykonano w tych samych warunkach akwizycji (światło i czas ekspozycji), a analizę przeprowadzono przy użyciu systemów oprogramowania LAS AS, Nikon TSI i ImageJ. Wykonano co najmniej 4 repliki biologiczne.
Wyniki i dyskusja
SEKCJE ARTYKUŁÓW
Projektowanie i synteza DNA-AuNP
Scheme 1
Scheme 2
Rycina 1. Obrazy z mikroskopu fluorescencyjnego kanałów (A, D, G) Cy3 i (B, E, H) FAM regionu żołądka żywej Hydry inkubowanej z nanosondami (A–C) specyficznymi do wykrywania mRNA Hymyc1, ( D–F) nanosondy zaprojektowane z sekwencją mieszającą, która nie wykrywa żadnego mRNA oraz (G–I) Hydra niepoddana działaniu nanosond. Wskaźnik kolorów dla różnych kanałów: czerwony (Cy3), sygnał fluorescencyjny odpowiadający uwolnieniu nici „flare”. Zielony (FAM), sygnał fluorescencyjny odpowiadający „sensownemu” uwolnieniu nici. Obrazy zwierzęcia w jasnym polu są również przedstawione w C, F i I. Słupki skali wynoszą 100 μm.
Jak widać na Ryc. 1 A, po inkubacji z nanosondami, które wykrywają mRNA Hymyc1, Hydra wykazała silny sygnał fluorescencji w kolumnie ciała z powodu uwolnienia nici „flare” znakowanej Cy3. Z drugiej strony, Rycina 1D pokazuje, że po inkubacji żywych zwierząt z mieszalnymi nanosondami nie wykryto sygnału odpowiadającego uwolnieniu „rozbłysku”. Słaba fluorescencja wykryta na Figurze 1D była porównywalna z sygnałem autofluorescencji wykrytym u żywych zwierząt przed leczeniem nanosondami (Figura 1G). Co więcej, uzyskano również obrazy jasnego pola i przedstawiono je na ryc. 1C, F i I, pokazując analizowaną część ciała Hydry. Dane te potwierdziły specyficzność systemu w zakresie dokładnego wykrywania docelowego mRNA. W każdym przypadku brak sygnału fluorescencji ze zmodyfikowanej FAM nici „sensownej” (Rysunek 1 B, E i H) potwierdził, że nić „sensowna” pozostała na powierzchni nanocząstek bez żadnych oznak degradacji w żywej tkance.
Ryciny 2 i 3 przedstawiają obrazy w większym powiększeniu po inkubacji z nanosondami Hymyc1. Jak widać, nanosonda Hymyc1 wytworzyła precyzyjny i rozpoznawalny wzór fluorescencyjny dzięki pojedynczym i gniazdom śródmiąższowych komórek macierzystych, odzwierciedlającym endogenny mRNA Hymyc1. Podobny wzór ekspresji został opisany przez hybrydyzację in situ na całej długości przy użyciu sond Hymyc1 RNA znakowanych digoksygeniną.(43-45)
Rysunek 2
Figure 2. Higher-magnification fluorescence microscopy images of the gastric region of live Hydra incubated with nanoprobes specific for the detection of Hymyc1 mRNA. The (A, B) Cy3, (C, D) bright-field and (E, F) merged channels are presented for images taken using a (A, C, E) 40× and (B, D, F) 63× oil immersion objective. Scale bars are 25 μm.
Figure 3
Rycina 3. Obrazy z mikroskopu fluorescencyjnego obszaru żołądka żywej Hydry inkubowanej z nanosondami specyficznymi do wykrywania mRNA Hymyc1, gdzie gniazda nematoblastów są widoczne i powiększone w prawym rogu zdjęć. (A) Obrazy uzyskane przy użyciu obiektywu 10×. (B) Obrazy uzyskane przy użyciu obiektywu 20×. Wzornik kolorów: czerwony (Cy3), sygnał fluorescencji odpowiadający uwolnieniu nici „flare”. Słupki skali mają 100 μm.
Podsumowując, wyniki te pokazują możliwość specyficznego wykrywania mRNA Hymyc1 w czasie rzeczywistym in vivo. Fakt, że w kolumnie ciała zwierzęcia nie można było zaobserwować zielonej fluorescencji oznacza, że nić „sensowna” nie została przemieszczona z powierzchni AuNP. Z drugiej strony, detekcja mRNA w komórkach oznacza cytoplazmatyczne dostarczanie AuNPs, gdzie obecne jest mRNA. Chociaż mechanizm wychwytu tych nanosond nie został jeszcze zbadany, opisano już, że 14 nm sferyczne AuNP niosące siRNA mogą bezpośrednio penetrować błonę komórkową komórek ektodermalnych już po 30 minutach inkubacji z Hydrą.(52) Unikanie klasycznego szlaków endocytarnych, AuNPs były w stanie dostarczyć siRNA i wywołać regulację w dół genu.(18) AuNPs znaleziono również na błonie komórek śródmiąższowych, gdzie Hymyc1 powinien ulegać ekspresji.
Wnioski
SEKCJE ARTYKUŁÓW
Informacje uzupełniające są dostępne bezpłatnie na ACS Publications website at DOI: 10.1021/acsami.8b17846.
Szczegółowa charakterystyka AuNP pokrytych DNA, taka jak widma UV-vis, obrazy z elektroforezy żelowej i pomiary potencjału zeta; uzupełniające obrazy fluorescencyjne i wyniki eksperymentalne żywej Hydry inkubowanej z nanosondami pokrytymi DNA (PDF)
http://orcid.org/0000-0002-9847-6706; - Autorski
- Maria Moros – Istituto di Scienze Applicate e Sistemi Intelligenti “E.Caianiello”, Consiglio Nazionale delle Ricerche, Pozzuoli 80078, Włochy
- Maria-Eleni Kyriazi – Fizyka i Astronomia, Wydział Nauk Fizycznych i Inżynierii, University of Southampton, Southampton SO171BJ, Wielka Brytania
- Afaf H. El-Sagheer – Department of Chemistry, University of Oxford, Chemistry Research Laboratory, 12 Mansfield Road, Oxford OX1 3TA, Wielka Brytania; Oddział Chemiczny, Wydział Nauki i Matematyki, Wydział Inżynierii Naftowej i Górniczej, Suez University, Suez 43721, Egipt;
http://orcid.org/0000-0001-8706-1292http://orcid.org/0000-0002-6538-3036Podziękowanie
SEKCJE ARTYKUŁÓW
A.K. i M.-E.K. dziękuję Leverhulme Trust (ref RPG-2015-005) i BBSRC (Grant BB/P017711/1) za finansowanie tego projektu. M.M. odnotowuje program badawczy i innowacyjny Unii Europejskiej Horyzont 2020 (umowa o grant Marie Skłodowska-Curie 660228).
Bibliografia
SEKCJE ARTYKUŁÓW
Ten artykuł odwołuje się do 52 innych publikacji.
1
Kelly, KL; Coronado, E.; Zhao, LL; Schatz, GC Właściwości optyczne nanocząstek metali: wpływ wielkości, kształtu i środowiska dielektrycznego. J. Fiz. Chem. B 2003, 107, 668–677, DOI: 10.1021/jp026731y
2
Cutler, J.I.; Auyeung, E.; Mirkin, CA sferyczne kwasy nukleinowe. J. Am. Chem. Soc. 2012, 134, 1376– 1391, DOI: 10.1021/ja209351u
3
Giljohann, D.A.; Seferos, D.S.; Daniel, WL; Massich, MD; Patel, PC; Mirkin, CA Gold nanocząsteczki dla biologii i medycyny. Angew. Chem., Int. Wyd. 2010, 49, 3280–3294, DOI: 10.1002/anie.200904359
4
Heuer-Jungemann, A.; Harimech, P.K.; Brązowy, T.; Kanaras, AG Gold Nanocząsteczki i DNA znakowane fluorescencyjnie jako platforma do wykrywania biologicznego. Nanoskala 2013, 5, 9503–9510, DOI: 10.1039/c3nr03707j
5
Bartczak, D.; Muskens, O.L.; Sanchez-Elsner, T.; Kanaras, AG; Millar, TM Manipulacja angiogenezą in vitro przy użyciu nanocząstek złota pokrytych peptydem. ACS Nano 2013, 7, 5628- 5636, DOI: 10.1021/nn402111z
6
El-Sayed, I.H.; Huang, XH; El-Sayed, M. A. Rozpraszanie rezonansu plazmonów powierzchniowych i absorpcja nanocząstek złota sprzężonych z przeciwciałem anty-EGFR w diagnostyce raka: zastosowania w raku jamy ustnej. Nano Lett. 2005, 5, 829–834, DOI: 10.1021/nl050074e
7
Lytton-Jean, A.K.R.; Mirkin, CA Badanie termodynamiczne do właściwości wiązania DNA funkcjonalizowanych sond nanocząstek złota i sond molekularnych fluoroforowych. J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 12754– 12755, DOI: 10.1021/ja052255o
8
Kyriazi, ME; Giust, D.; El-Sagheer, A.H.; Lackie, P.M.; Muskens, O.L.; Brązowy, T.; Kanaras, AG Multiplexed mRNA Sensing i kombinatorycznie ukierunkowane dostarczanie leków przy użyciu dimerów nanocząstek DNA-Gold. ACS Nano 2018, 12, 3333– 3340, DOI: 10.1021/acsnano.7b08620
9
Heuer-Jungemann, A.; El-Sagheer, A.H.; Lackie, P.M.; Brązowy, T.; Kanaras, AG Selektywne zabijanie komórek wyzwalane przez ich sygnaturę mRNA w obecności inteligentnych nanocząstek. Nanoskala 2016, 8, 16857–16861, DOI: 10.1039/C6NR06154K
10
Barnaby, S.N.; Perelman, GA; Kohlstedt, K.L.; Chinen, AB; Schatz, GC; Mirkin, CA Rozważania projektowe dla sferycznych kwasów nukleinowych RNA (SNA). Biokoniugat Chem. 2016, 27, 2124–2131, DOI: 10.1021/acs.bioconjchem.6b00350
11
Ding, Y.; Jiang, Z.W.; Saha, K.; Kim, CS; Kim, ST; Landis, RF; Rotello, VM Gold Nanocząsteczki do dostarczania kwasów nukleinowych. Mol. Tam. 2014, 22, 1075–1083, DOI: 10.1038/mt.2014.30
12
Rosi, N.L.; Giljohann, D.A.; Thaxton, CS; Lytton-Jean, A.K.R.; Han, MS; Mirkin, CA Nanocząsteczki złota modyfikowane oligonukleotydami do wewnątrzkomórkowej regulacji genów. Science 2006, 312, 1027–1030, DOI: 10.1126/science.1125559
13
Giljohann, D.A.; Seferos, D.S.; Prigodich, A.E.; Patel, PC; Mirkin, CA Gene Regulacja z wielowartościowymi koniugatami siRNA-nanocząstek. J. Am. Chem. Soc. 2009, 131, 2072-2073, DOI: 10.1021/ja808719p
14
Cutler, J.I.; Zhang K.; Zheng, D.; Auyeung, E.; Prigodich, A.E.; Mirkin, CA Nanostruktury wielowartościowych kwasów nukleinowych. J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 9254- 9257, DOI: 10.1021/ja203375n
15
Jensen, SA; Dzień, ES; Ko, CH; Hurley, LA; Luciano, J.P.; Kouri, FM; Merkel, TJ; Luthi, A.J.; Patel, PC; Cutler, J.I.; Daniel, WL; Scott, A.W.; Rotz, MW; Meade, T.J.; Giljohann, D.A.; Mirkin, CA; Stegh, AH sferyczne koniugaty nanocząstek kwasu nukleinowego jako terapia oparta na RNAi dla glejaka wielopostaciowego. Nauka. Przeł. Med. 2013, 5, 209ra152, DOI: 10.1126/scitranslmed.3006839
16
Sita, T.L.; Kouri, FM; Hurley, LA; Merkel, TJ; Chalastanis, A.; maj, J.L.; Ghelfi, ST; Cole, L.E.; Cayton, TC; Barnaby, S.N.; Sprangers, A.J.; Savalia, N.; James, CD; Lee, A.; Mirkin, CA; Stegh, AH Podwójna bioluminescencja i monitorowanie fluorescencji w bliskiej podczerwieni w celu oceny aktywności nanokoniugatów sferycznych kwasów nukleinowych in vivo. Proc. Natl. Acad. Nauka. USA 2017, 114, 4129-4134, DOI: 10.1073/pnas.1702736114
17
Conde, J.; Tian, FR; Hernandez, Y.; Bao, CC; Cui, DX; Janssen, K.P.; Ibarra, MR; Baptista, P.V.; Stoeger, T.; de la Fuente, JM In vivo Celowanie w guza za pośrednictwem terapeutycznego siRNA za pośrednictwem nanocząstek w połączeniu z odpowiedzią zapalną w modelach myszy z rakiem płuc. Biomateriały 2013, 34, 7744–7753, DOI: 10.1016/j.biomaterials.2013.06.041
18
Conde, J.; Ambrosone, A.; Sanz, V.; Hernandez, Y.; Marchesano, V.; Tian, F.; Dziecko, H.; Berry, CC; Ibarra, MR; Baptista, P.V.; Tortiglione, C.; de la Fuente, JM Projektowanie wielofunkcyjnych nanocząstek złota do wyciszania genów In Vitro i In Vivo. ACS Nano 2012, 6, 8316- 8324, DOI: 10.1021/nn3030223
19
Conde, J.; Ambrosone, A.; Hernandez, Y.; Tian, FR; McCully, M.; Berry, CC; Baptista, P.V.; Tortiglione, C.; de la Fuente, JM 15 lat na dostawę siRNA: Beyond the State-of-the-Art w sprawie nieorganicznych nanocząstek dla RNAi Therapeutics. Nano Today 2015, 10, 421–450, DOI: 10.1016/j.nantod.2015.06.008
20
Halo, T.L.; McMahon, KM; Angeloni, NL; Xu, Y.; Wang, W.; Chinen, AB; Malin, D.; Strekałowa, E.; Cryns, V.L.; Cheng, C.; Mirkin, CA; Thaxton, CS NanoFlares do wykrywania, izolacji i hodowli żywych komórek nowotworowych z ludzkiej krwi. Proc. Natl. Acad. Nauka. USA 2014, 111, 17104-17109, DOI: 10.1073/pnas.1418637111
21
Seferos, D.S.; Giljohann, D.A.; Hill, H.D.; Prigodich, A.E.; Mirkin, CA Nano-flary: Sondy do transfekcji i wykrywania mRNA w żywych komórkach. J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 15477–15479, DOI: 10.1021/ja0776529
22
Yang, YJ; Huang, J.; Yang, XH; Quan, K.; Wang, H.; Ying, L.; Xie, N.L.; Ou, M.; Wang, KM FRET Nanoflares do wewnątrzkomórkowego wykrywania mRNA: unikanie fałszywych sygnałów dodatnich i minimalizowanie skutków fluktuacji systemu. J. Am. Chem. Soc. 2015, 137, 8340 – 8343, DOI: 10.1021/jacs.5b04007
23
Jayagopal, A.; Półpensa, K.C.; Perez, JW; Wright, DW Hairpin DNA-funkcjonalizowane koloidy złota do obrazowania mRNA w żywych komórkach. J. Am. Chem. Soc. 2010, 132, 9789–9796, DOI: 10.1021/ja102585v
24
Zhou, Q.M.; Qian, Z.Y.; Gu, Y. Q. Wykrywanie ekspresji mRNA MDR1 za pomocą Optimized Gold Nanoparticle Beacon. W konferencji na temat reporterów, markerów, barwników, nanocząstek i sond molekularnych do zastosowań biomedycznych VIII; SPIE, 2016. DOI: 10.1117/12.2220035 .
25
Vilela, P.; Heuer-Jungemann, A.; El-Sagheer, A.; Brązowy, T.; Muskens, O.L.; Smyth, NR; Kanaras, AG Wykrywanie mRNA wimentyny w modelach 2D i 3D zranionej skóry przy użyciu nanocząsteczek złota pokrytych DNA. Mały 2018, 14, 1703489, DOI: 10.1002/smll.201703489
26
Prigodich, A.E.; Randeria, PS; Briley, WE; Kim, N.J.; Daniel, WL; Giljohann, D.A.; Mirkin, CA Multiplexed Nanoflares: wykrywanie mRNA w żywych komórkach. Analny. Chem. 2012, 84, 2062-2066, DOI: 10.1021/ac202648w
27
Li, N.; Chang, C.; Pan, W.; Tang, B. A Multicolor Nanoprobe do wykrywania i obrazowania mRNA związanych z nowotworem w żywych komórkach. Angew. Chem., Int. Wyd. 2012, 51, 7426–7430, DOI: 10.1002/nie.2012103767
28
Qiao, G.M.; Gao, Y.; Li, N.; Yu, Z.Z.; Zhuo, LH; Tang, B. Jednoczesne wykrywanie mRNA wewnątrzkomórkowego guza z obrazowaniem dwukolorowym w oparciu o nanocząsteczkę złota / latarnię molekularną. Chem. – Eur. J. 2011, 17, 11210–11215, DOI: 10.1002/chem.201100658
29
Pan, W.; Zhang, T.; Yang, H.; Diao, W.; Li, N.; Tang, B. Multipleksowane wykrywanie i obrazowanie wewnątrzkomórkowych mRNA przy użyciu czterokolorowej nanosondy. Analny. Chem. 2013, 85, 10581–10588, DOI: 10.1021/ac402700s
30
Tu, YQ; Wu, P.; Zhang, H.; Cai, C. X. Wygaszanie fluorescencyjne nanocząstek złota integrowanych za pomocą sondy oligonukleotydowej z przełączaną konformacją do wykrywania mikroRNA. Chem. Komunia. 2012, 48, 10718– 10720, DOI: 10.1039/c2cc35564g
31
Li, J.; Huang, J.; Yang, X.; Yang, Y.; Quan, K.; Xie, N.; Wu, Y.; Ma, C.; Wang, K. Dwukolorowe nanorozbłyski do obrazowania multipleksowanych mikroRNA w żywych komórkach. Nanotheranostics 2018, 2, 96–105, DOI: 10.7150/ntnr 22960
32
Ambrosone, A.; Mattera, L.; Marchesano, V.; Quarta, A.; Susha, AS; Tino, A.; Rogach, A.L.; Tortiglione, C. Mechanizmy leżące u podstaw toksyczności indukowanej przez kropki kwantowe CdTe określone w bezkręgowym organizmie modelowym. Biomateriały 2012, 33, 1991–2000, DOI: 10.1016/j.biomaterials.2011.11.041
33
Tortiglione, C.; Antognazza, MR; Tino, A.; Bossio, C.; Marchesano, V.; Bauduin, A.; Zangoli, M.; Morata, SV; Lanzani, G. Semiconducting Polymers to lekkie nanoprzetworniki u zwierząt bez oczu. Nauka. Przysł. 2017, 3, e1601699, DOI: 10.1126/sciadv.1601699
34
Ambrosone, A.; Roopin, M.; Pelaz B.; Abdelmonem, AM; Ackermann, L.M.; Mattera, L.; Allocca, M.; Tino, A.; Klapper, M.; Parak, WJ; Pobory, O.; Tortiglione, C. Przecinanie wspólnych i rozbieżnych ścieżek molekularnych wywoływanych przez kropki kwantowe CdSe/ZnS u bezkręgowców słodkowodnych i morskich. Nanotoksykologia 2017, 11, 289-303, DOI: 10.1080/17435390.2017.1295111
35
Marchesano, V.; Hernandez, Y.; Salvenmoser, W.; Ambrosone, A.; Tino, A.; Hobmayera, B.; M de la Fuente, J.; Tortiglione, C. Obrazowanie wewnętrznego i zewnętrznego handlu nanocząstkami złota w całych zwierzętach. ACS Nano 2013, 7, 2431–2442, DOI: 10.1021/nn305747e
36
Morosa, M.; Ambrosone, A.; Stępień G.; Fabozzi, F.; Marchesano, V.; Castaldi, A.; Tino, A.; de la Fuente, J.M.; Tortiglione, C. Odszyfrowywanie zdarzeń wewnątrzkomórkowych wywołanych przez łagodną hipertermię magnetyczną In Vitro i In Vivo. Nanomedycyna 2015, 10, 2167–2183, DOI: 10.2217/nnm.15.70
37
Ambrosone, A.; Marchesano, V.; Carregal- Romero, S.; Intartaglia, D.; Parak, WJ; Tortiglione, C. Kontrola szlaku sygnałowego Wnt/beta-kateniny in vivo za pomocą kapsułek reagujących na światło. ACS Nano 2016, 10, 4828–4834, DOI: 10.1021/acsnano.5b07817
38
Malvindi, MA; Węgiel, L.; Quarta, A.; Tino, A.; Manna, L.; Pellegrino, T.; Tortiglione, C. Nanokryształy w kształcie pręta wywołują aktywność neuronalną in vivo. Mały 2008, 4, 1747-1755, DOI: 10.1002/smll.200800413
39
Tortiglione, C., Starożytny organizm modelowy do testowania in vivo Nowe funkcjonalne nanokryształy w inżynierii biomedycznej: od teorii do zastosowania; Fazel-Rezai, R., wyd.; InTech: 2011; Tom. Inżynieria biomedyczna: od teorii do zastosowania, s. 225-252.
40
Bode, HR Linia komórek śródmiąższowych Hydry: układ komórek macierzystych, który powstał na początku ewolucji. J. Celi Sci. 1996, 109, 1155–1164
41
Hobmayera, B.; Jenewein, M.; Eder, D.; Edera, MK; Glasauer, S.; Guflera, S.; Hartl, M.; Salvenmoser, W. Stemness w Hydrze – aktualna perspektywa. wewn. J. Dev. Biol. 2012, 56, 509-517, DOI: 10.1387/ijdb.113426bh
42
David, CN; Gier A. Kinetyka cykluer naszej edycji, rozwój Hydra Attenu. III. Różnicowanie nerwów i nematocytów. J. Celi Sci. 1974, 16, 359–375
43
Hartl, M.; Mitterstiller, AM; Valovka, T.; Breuker, K.; Hobmayera, B.; Bister, K. Specyficzna dla komórek macierzystych Aktywacja przodkowego protoonkogenu myc z zachowanymi podstawowymi funkcjami we wczesnej hydrze metazoańskiej. Proc. Natl. Acad. Nauka. USA 2010, 107, 4051-4056, DOI: 10.1073/pnas.0911060107
44
Ambrosone, A.; Marchesano, V.; Tino, A.; Hobmayera, B.; Tortiglione, C. Hymyc1 Downregulacja promuje proliferację komórek macierzystych w Hydra Vulgaris. PLoS One 2012, 7, e30660, DOI: 10.1371/journal.pone.0030660
45
Hartl, M.; Glasauer, S.; Valovka, T.; Breuker, K.; Hobmayera, B.; Bister, K. Hydra myc2, wyjątkowy przedbilateriański członek rodziny Myc Gene, jest aktywowany w proliferacji komórek i gametogenezie. Biol. Otwarte 2014, 3, 397– 407, DOI: 10.1242/bio.20147005
46
Dang, C.V.; O’Donnell, K.A.; Zeller, K.I.; Nguyen, T.; Osthus, RC; Li, F. Sieć genów docelowych c-Myc. Nasienie. Rak Biol. 2006, 16, 253–64, DOI: 10.1016/j.semcancer.2006.07.014
47
Amati, B.; Brooks, MW; Opłata, N.; Littlewood, TD; Evan, GI; Land, H. Onkogenna aktywność białka c-Myc wymaga dimeryzacji z Max. Komórka 1993, 72, 233–245, DOI: 10.1016/0092-8674(93)90663-B
48
Eilers, M.; Eisenman, R. N. Myc’s Broad Reach. Genes Dev. 2008, 22 (20), 2755– 2766, DOI: 10.1101/gad.1712408
49
Wilby, OK; Tesh, JM The Hydra Assay jako wczesny ekran potencjału teratogennego. Toksykol. In Vitro 1990, 4, 582–583, DOI: 10.1016/0887-2333(90)90119-E
50
Wilby, OK; Tesh, JM The Hydra Assay jako prawie ekran dla potencjału teratogennego. Toksykol. In Vitro 1990, 4, 582–583, DOI: 10.1016/0887-2333(90)90119-E
51
Ambrosone, A.; Pino, PD; Marchesano, V.; Parak, WJ; de la Fuente, J.M.; Tortiglione, C. Złote nanopryzmaty do ablacji komórek fototermicznych in vivo. Nanomedycyna 2014, 9, 1913-1922, DOI: 10.2217/nnm.14.100
52
Marchesano, V.; Hernandez, Y.; Salvenmoser, W.; Ambrosone, A.; Tino, A.; Hobmayera, B.; de la Fuente, J.M.; Tortiglione, C. Obrazowanie wewnętrznego i zewnętrznego handlu nanocząstkami złota w całych zwierzętach. ACS Nano 2013, 7, 2431–2442, DOI: 10.1021/nn305747e
Cytowany przez
Artykuł ten jest cytowany w 14 publikacjach.
- Jin Woong Lee, Seok-Ryul Choi, Jun Hyuk Heo. Jednoczesna stabilizacja i funkcjonalizacja nanocząstek złota za pomocą koniugacji biomolekuł: postęp i perspektywy. Materiały i interfejsy stosowane przez ACS 2021, 13 (36), 42311-42328. https://doi.org/10.1021/acsami.1c10436
- Miguel Xavier, Maria-Eleni Kyriazi, Stuart Lanham, Konstantina Alexaki, Elloise Matthews, Afaf H. El-Sagheer, Tom Brown, Antonios G. Kanaras, Richard O. C. Oreffo. Wzbogacenie komórek macierzystych szkieletu ludzkiego szpiku kostnego za pomocą kulistych kwasów nukleinowych. ACS Nano 2021, 15 (4), 6909-6916. https://doi.org/10.1021/acsnano.0c10683
- Alexander B. Cook, Paolo Decuzzi. Wykorzystanie bodźców endogennych dla materiałów reagujących w teranostyce. ACS Nano 2021, 15 (2), 2068-2098. https://doi.org/10.1021/acsnano.0c09115
- Maria Moros, Anna Lewińska, Francesco Merola, Pietro Ferraro, Maciej Wnuk, Angela Tino, Claudia Tortiglione. Złote nanopręty i nanopryzmaty pośredniczą w różnych mechanizmach śmierci komórek fototermicznych in vitro i in vivo. ACS Applied Materials & Interfaces 2020, 12 (12), 13718-13730. https://doi.org/10.1021/acsami.0c02022
- Giulia Veronesi, Maria Moros, Hiram Castillo-Michel, Lucia Mattera, Giada Onorato, Karl David Wegner, Wai Li Ling, Peter Reiss, Claudia Tortiglione. Biotransformacje in vivo kropek kwantowych fosforku indu ujawnione w mikrospektroskopii rentgenowskiej. ACS Applied Materials & Interfaces 2019, 11 (39), 35630-35640. https://doi.org/10.1021/acsami.9b15433
- Qinrui Fu, Zhi Li, Fengfu Fu, Xiaoyuan Chen, Jibin Song, Huanghao Yang. Zespoły plazmoniczne reagujące na bodźce i ich zastosowania biomedyczne. Nano Dzisiaj 2021, 36 , 101014. https://doi.org/10.1016/j.nantod.2020.101014
- Mingce Tian, Zhiqin Yuan, Ying Liu, Chao Lu, Zhongju Ye, Lehui Xiao. Najnowsze postępy w analizie optycznej opartej na nanocząstkach plazmonicznych w jednorodnym roztworze i na poziomie pojedynczych nanocząstek. Analityk 2020, 145 (14), 4737-4752. https://doi.org/10.1039/D0AN00609B
- Jing Li, Shijun Cai, Bing Zhou, Xiangxian Meng, Qiuping Guo, Xiaohai Yang, Jin Huang, Kemin Wang. Fotoklatkowe nanorozbłyski FRET do obrazowania wewnątrzkomórkowego mikroRNA. Komunikacja chemiczna 2020, 56 (45), 6126-6129. https://doi.org/10.1039/D0CC02395G
- Xiaoting Ji, Zhenbo Wang, Shuyan Niu, Caifeng Ding. Synteza bez matrycy porowatych nanosfer węglowych pokrytych hydrożelem usieciowanym DNA do jednoczesnego obrazowania podwójnych biomarkerów w żywych komórkach. Komunikacja chemiczna 2020, 56 (39), 5271-5274. https://doi.org/10.1039/D0CC00499E
- Yao Yu, Ting Yang, Taolei Sun. Nowe spojrzenie na syntezę, toksyczność i zastosowania nanocząstek złota w obrazowaniu CT i leczeniu raka. Nanomedycyna 2020, 15 (11), 1127-1145. https://doi.org/10.2217/nnm-2019-0395
- Xiaoting Ji, Zhenbo Wang, Shuyan Niu, Caifeng Ding. Porowate nanosfery węglowe funkcjonalizowane DNAzymem służą jako nanosondy fluorescencyjne do obrazowania wykrywania mikroRNA-21 i jonów cynku w żywych komórkach. Microchimica Acta 2020, 187 (4) https://doi.org/10.1007/s00604-020-04226-6
- Maria Moros, Francesca Di Maria, Principia Dardano, Giuseppina Tommasini, Hiram Castillo-Michel, Alessandro Kovtun, Mattia Zangoli, Martina Blasio, Luca De Stefano, Angela Tino, Giovanna Barbarella, Claudia Tortiglione. In Vivo Bioinżynieria mikrowłókien fluorescencyjnych przewodzących białkowo-barwnikowych. iScience 2020, 23 (4) , 101022. https://doi.org/10.1016/j.isci.2020.101022
- Devleena Samanta, Sasha B. Ebrahimi, Czad A. Mirkin. Struktury kwasów nukleinowych jako sondy wewnątrzkomórkowe żywych komórek. Materiały zaawansowane 2020, 32 (13), 1901743. https://doi.org/10.1002/adma.201901743
- He Zhou, Hongwei Yang, Guangke Wang, Aijun Gao, Zhiqin Yuan. Najnowsze postępy plazmonicznych nanocząstek złota w wykrywaniu optycznym i terapii. Aktualny projekt farmaceutyczny 2020, 25 (46), 4861-4876. https://doi.org/10.2174/1381612826666191219130033
Brak komentarzy:
Prześlij komentarz